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1、定義

左旋肉堿，L－肉堿，別稱L－肉毒堿、維生素BT，化學(xué)名稱β－羥基γ－三甲銨丁酸，是一種白色晶狀體或白色透明細(xì)粉。

左旋肉堿是一種促使脂肪轉(zhuǎn)化為能量的類氨基酸。對(duì)人體無(wú)毒副作用。特別適合人們配合做有氧運(yùn)動(dòng)來(lái)減脂，效果比較明顯。

不同類型的日常飲食已經(jīng)含有5-100毫克的左旋肉堿。左旋肉堿在人體的肝臟和腎中產(chǎn)生，并儲(chǔ)存在肌肉、精液、腦和心臟中。

2、左旋肉堿食物來(lái)源

紅肉是L-左旋肉堿的主要食物來(lái)源，其他以動(dòng)物性的食物包括魚、家禽和牛奶制品，印尼豆豉(由大豆發(fā)酵而成)、小麥和鱷梨等均含有該營(yíng)養(yǎng)素。

3、L-左旋肉堿的生理功能：

它在體內(nèi)作為一種載體，以乙酰左旋肉堿形式將中長(zhǎng)鏈的脂肪酸，從細(xì)胞線粒體膜外轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜內(nèi)，于線粒體基質(zhì)內(nèi)進(jìn)行氧化而產(chǎn)生人體能量，其生理作用歸納如下：

1）運(yùn)長(zhǎng)鏈的脂肪酸通過(guò)線粒體膜，促進(jìn)脂肪氧化；

2）肌肉包括心肌提供能量；

3）調(diào)節(jié)脂肪代謝；

4）幫助清除血液中甘油三酯、膽固醇和乳酸，促進(jìn)氨解毒作用；

5）促進(jìn)乙酰膽堿和多巴胺的合成。

4、用途

目前左旋肉堿已應(yīng)用于醫(yī)藥、保健和食品等領(lǐng)域，并已被瑞士、法國(guó)、美國(guó)和世界衛(wèi)生組織規(guī)定為法定的多用途營(yíng)養(yǎng)劑。

肉堿的研究始于20世紀(jì)初期。

1905年：俄國(guó)科學(xué)家從肌肉中提取并分離出L-Carnitine;

1940年：Frankle發(fā)現(xiàn)L-Carnitine是人體必需物質(zhì)，并將其命名為“維生素BT”；

1959年：Fritz確認(rèn)L-Carnitine是脂肪氧化過(guò)程中必需載體，為機(jī)體提供能量來(lái)源，從而確認(rèn)其為人體必需物質(zhì)；

1980年：美國(guó)食品、藥品管理局（FDA）管理手冊(cè)登載L-Carnitine為天然物質(zhì)；

1990年：美國(guó)藥典第二十二版收載L-Carnitine；

1991年：獲得瑞士和美國(guó)專利號(hào)（USAPatentnumber5,0730,373日期：Dec.17.1991）；

1993年：獲得美國(guó)食品、藥品管理局（FDA）世界衛(wèi)生組織（WHO）認(rèn)可，美國(guó)專家委員會(huì)確認(rèn)L-Carnitine的安全性；德國(guó)衛(wèi)生部規(guī)定使用左旋肉堿無(wú)需最高上限；

1994年：美國(guó)藥典第二十三版收載L-Carnitine原料外，又增載片劑和口服液；

1996年：我國(guó)衛(wèi)生部將其批準(zhǔn)為食品添加劑，列入營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑類。

目前左旋肉堿已應(yīng)用于醫(yī)藥、保健和食品等領(lǐng)域，并已被瑞士、法國(guó)、美國(guó)和世界衛(wèi)生組織規(guī)定為法定的多用途營(yíng)養(yǎng)劑。我國(guó)食品添加劑衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB2960－1996規(guī)定了左旋肉堿酒石酸鹽為食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑，可應(yīng)用于咀嚼片、飲液、膠囊、乳粉及乳飲料等。略……

L-肉堿的體外生產(chǎn)包括提取法、合成法、微生物發(fā)酵法與酶轉(zhuǎn)化法4種。其中酶轉(zhuǎn)化法又可分為DL肉堿衍生物的酶法拆分、β-脫氫肉堿的酶法轉(zhuǎn)化、反式巴豆堿的酶法水解與γ-丁酰甜菜堿的酶法羥化4種。

制備方法評(píng)價(jià)分析：

1、直接提取法得到的左旋肉堿的絕對(duì)量少，并且因有結(jié)構(gòu)類似物的存在而難以分離，提取純化較繁鎖，得率低，不適合工業(yè)化生產(chǎn)，經(jīng)濟(jì)性不合理。

2、生物合成法嚴(yán)格限制在肝、腎組織，還需煙酸、維生素C、維生素B6、Fe2+的參與，其中維生素C對(duì)肉堿的合成速度影響最大。合成-分子賴氨酸和三分子蛋氨酸，賴氨酸提供碳鏈和氮原子，蛋氨酸提供甲基。肌肉組織中肉堿含量雖然高，但要依賴來(lái)自肝、腎的血液輸送。

3、工業(yè)上常采用以還氧氯丙烷為起始原料的化學(xué)合成法，可在反應(yīng)的不同步驟中進(jìn)行化學(xué)拆分或反應(yīng)前加人手性試劑進(jìn)行不對(duì)稱誘導(dǎo)得到左旋肉堿。該法簡(jiǎn)便，原料廉價(jià)，收率較好，但必須解決NaCN等造成的污染。

4、化學(xué)拆分法避開了有毒的氰化物和氯化汞，且無(wú)需離子交換樹脂，操作安全，簡(jiǎn)便;生物拆分法盡管純度很高，但得率太低;通過(guò)消旋處理得到的右旋肉堿在以前是作為廢物處理的經(jīng)過(guò)一系列反應(yīng)得到左旋肉堿，這對(duì)于廢物利用、降低成本以及環(huán)境保護(hù)都有很重要的意義。

5、微生物發(fā)酵法生產(chǎn)肉堿水平較低，如液體發(fā)酵法一般含肉堿0.3~0.4mg/g干菌體。另外，由于菌種篩選較復(fù)雜，許多研究仍停留在實(shí)驗(yàn)室水平。

6、從脫氫肉堿出發(fā)的肉堿衍生物轉(zhuǎn)變法必須利用昂貴的輔酶NADH，只適于實(shí)驗(yàn)室操作從巴豆甜菜堿出發(fā)的肉堿衍生物轉(zhuǎn)變法利用拆分廢物作原料，降低了成本，潛力較大;從γ-丁基甜菜堿出發(fā)的肉堿衍生物轉(zhuǎn)變法盡管轉(zhuǎn)化率及產(chǎn)量都很高，但由于成本昂貴限制了工業(yè)化的生產(chǎn)規(guī)模。

7、通過(guò)基因重組技術(shù)生產(chǎn)左旋肉堿尚處于試驗(yàn)階段，由于此法潛在的優(yōu)越性，將是今后的研究熱點(diǎn)。

一、肉堿在體內(nèi)的合成過(guò)程

L-Lys和L-Met在體內(nèi)合成L-肉堿最初是在20世紀(jì)70年代被發(fā)現(xiàn)的。從此研究者們揭示了這種氨基酸衍生物在動(dòng)物健康和疾病中起著極其重要的作用（Tanphaichitr等,1971）。肝臟和腎臟是合成L-肉堿的主要合成部位，只有肝臟、腎臟和大腦包含全部過(guò)程所需要的酶。L-肉堿是由Lys、Met、三種維生素（煙酸、抗壞血酸、VB6）、二價(jià)鐵離子和酶的參與下合成的，Lys提供C架（HorneandBroquist,1973;Tanphaichitr等,1973），4個(gè)N甲基則來(lái)自于Met（Tanphaichitr等,1971），Lys和Met之比為1：3.合成過(guò)程見下圖。合成后可直接被組織細(xì)胞吸收利用或轉(zhuǎn)供給其它組織細(xì)胞。

L-肉堿的合成路徑

 

二、制備方法

1、直接提取法

早期的左旋肉堿是從肉浸膏中分離出來(lái)的，典型的方法是Carter等1952年用4508牛肉浸膏提取0.6g純晶肉堿。近年仍有關(guān)于從牛肉或牛乳處理液中提取左旋肉堿的專利報(bào)道。

2、生物合成法

L-肉堿的生物合成始于賴氨酸和蛋氨酸。首先是富含賴氨酸的蛋白質(zhì)在蛋白質(zhì)甲基化酶的催化下，由ti-腺昔蛋氨酸供給甲基將多膚鏈中的賴氨酸轉(zhuǎn)化為E一三甲基賴氨酸，隨后通過(guò)體內(nèi)蛋白酶水解生成三甲基賴氨酸，再通過(guò)四步酶促反應(yīng)合成L-肉堿。

3、化學(xué)合成法

1）以環(huán)氧氯丙烷為起始原料

 

2）以氯乙酞乙酸乙醋為起始原料

3）以甘露糖醇為起始原料

4、消旋體拆分法

化學(xué)合成消旋肉堿雖已完全工業(yè)化，但由于不能將L-型和有負(fù)作用的D-型分開，一般禁止使用。如果將消旋肉堿(DL-肉堿)乙酞化再光學(xué)拆分，可得到較高光學(xué)純度的左旋肉堿。

1）化學(xué)拆分

美國(guó)專利3151149使用D-(+)一樟腦-10-磺酸對(duì)DL-肉堿進(jìn)行拆分，但要使用AgN03除去(Ag+C1-，成本高，收率低(<50%)，純度低存在)，生產(chǎn)條件苛刻(A邪I見光使容器變黑)。李全等人研究了左旋肉堿鹽酸鹽的新合成法，以氯乙酸乙醋為原料，經(jīng)格氏反應(yīng)、還原、錢化、水解及拆分反應(yīng)，合成了產(chǎn)物(3302.

2）生物拆分

利用微生物專一降解右旋肉堿的能力生產(chǎn)左旋肉堿。Charles多次試驗(yàn)選育出降解右旋肉堿有特效的菌株，經(jīng)259C,44h的培養(yǎng)，右旋肉堿全部消失，左旋肉堿剩下38%03。

3）酶法拆分

將DL-肉堿酞化，制成酞胺、乙酞肉堿等再篩選動(dòng)物微生物中存在的醋酶、酞胺酶等進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化。中山清等報(bào)道用假單抱菌的酞胺酶光學(xué)拆分DL-構(gòu)型的消旋肉堿，以制備得到光學(xué)純度為99%的左旋肉堿。

4）右旋肉堿的再利用

消旋所得的右旋肉堿以前是作廢物處理的Giannessi從右旋肉堿出發(fā)，經(jīng)酞化、酸水解、內(nèi)醋化、水解，再通過(guò)離子交換柱，加上McS02C1然后在NatC03水溶液中攪拌可得到左旋肉堿。

5、微生物發(fā)酵法

細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌等許多微生物中都有能水解合成L-肉堿的菌株。利用液體深層培養(yǎng)或固體發(fā)酵，篩選優(yōu)良菌株，可生產(chǎn)左旋肉堿。瑞士龍沙公司已將微生物發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)左旋肉堿酒石酸。

6、肉堿衍生化法

1）從脫氫肉堿出發(fā)

在由40單位的肉堿脫氫酶、NAD;2mM、甲酸脫氫酶40單位、HC02NH4150mM,磷酸50mM(pH7.5),氯霉素6mg/50mL組成的混合液中勻速加人脫氫肉堿鹽酸鹽0.8M、甲酸0.8M。加完后，調(diào)節(jié)溫度至3090，加人2MNHo0H，調(diào)pH7.0。經(jīng)過(guò)70h，獲得10.3g左旋肉堿，收率96%。

2）從巴豆甜菜堿出發(fā)

巴豆甜菜堿是生物合成L-肉堿的前體。江蘇省微生物研究所用此法酶轉(zhuǎn)化產(chǎn)L-肉堿5g/L，轉(zhuǎn)化率40%。

7、基因重組技術(shù)法

在傳統(tǒng)發(fā)酵基礎(chǔ)上，通過(guò)基因重組技術(shù)得到高轉(zhuǎn)化率的微生物菌株，生產(chǎn)左旋肉堿。1995年Eichler將大腸桿菌中CaiD.CaiE基因克隆，并獲得轉(zhuǎn)基因工程菌E.colik38，使其肉堿消旋酶的含量及活性顯著提高，可用于將DL一肉堿轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)一肉堿。

三、主要裝置

工業(yè)上常采用以還氧氯丙烷為起始原料的化學(xué)合成法，可在反應(yīng)的不同步驟中進(jìn)行化學(xué)拆分或反應(yīng)前加人手性試劑進(jìn)行不對(duì)稱誘導(dǎo)得到左旋肉堿。該法簡(jiǎn)便，原料廉價(jià)，收率較好，但必須解決NaCN等造成的污染。

左旋肉堿生產(chǎn)設(shè)備

 

四、制備方法評(píng)價(jià)

(1)直接提取法得到的左旋肉堿的絕對(duì)量少，并且因有結(jié)構(gòu)類似物的存在而難以分離。提取純化較繁鎖，得率低，不適合工業(yè)化生產(chǎn)，經(jīng)濟(jì)性不合理。

(2)生物合成法嚴(yán)格限制在肝、腎組織，還需煙酸、維生素C、維生素B6、Fe2+的參與，其中維生素C對(duì)肉堿的合成速度影響最大。合成一分子賴氨酸和三分子蛋氨酸，賴氨酸提供碳鏈和氮原子，蛋氨酸提供甲型。肌肉組織中肉堿含量雖然高，但要依賴來(lái)自肝、腎的血液輸送。

(3)工業(yè)上常采用以還氧氯丙烷為起始原料的化學(xué)合成法，可在反應(yīng)的不同步驟中進(jìn)行化學(xué)拆分或反應(yīng)前加人手性試劑進(jìn)行不對(duì)稱誘導(dǎo)得到左旋肉堿。該法簡(jiǎn)便，原料廉價(jià)，收率較好，但必須解決NaCN等造成的污染。

(4)化學(xué)拆分法避開了有毒的氰化物和氯化汞，且無(wú)需離子交換樹脂，操作安全，簡(jiǎn)便；生物拆分法盡管純度很高，但得率太低；通過(guò)消旋處理得到的右旋肉堿在以前是作為廢物處理的，經(jīng)過(guò)一系列反應(yīng)得到左旋肉堿，這對(duì)于廢物利用、降低成本以及環(huán)境保護(hù)都有很重要的意義。

(5)微生物發(fā)酵法生產(chǎn)肉堿水平較低，如液體發(fā)酵法一般含肉堿0．3～0．4mg／g干菌體。另外，由于菌種篩選較復(fù)雜，許多研究仍停留在實(shí)驗(yàn)室水平。

(6)從脫氫肉堿出發(fā)的肉堿衍生物轉(zhuǎn)變法必須利用昂貴的輔酶NADH，只適于實(shí)驗(yàn)室操作；從巴豆甜菜堿出發(fā)的肉堿衍生物轉(zhuǎn)變法利用拆分廢物作原料，降低了成本，潛力較大；從^r一丁基甜菜堿出發(fā)的肉堿衍生物轉(zhuǎn)變法盡管轉(zhuǎn)化率及產(chǎn)量都很高，但由于成本昂貴限制了工業(yè)化的生產(chǎn)規(guī)模。

(7)通過(guò)基因重組技術(shù)生產(chǎn)左旋肉堿尚處于試驗(yàn)階段，由于此法潛在的優(yōu)越性，將是今后的研究熱點(diǎn)。略……

上游行業(yè)——環(huán)氧氯丙烷

1、行業(yè)生產(chǎn)狀況

近年來(lái)，隨著下游環(huán)氧樹脂和聚碳酸酯需求的大幅增長(zhǎng)，以及高額利潤(rùn)的驅(qū)使，環(huán)氧氯丙烷成為國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)關(guān)注的熱點(diǎn)。目前，全球環(huán)氧氯丙烷產(chǎn)能約為155萬(wàn)噸/年，未來(lái)3年還有近50萬(wàn)噸/年的產(chǎn)能投產(chǎn)。預(yù)計(jì)到2010年，全球產(chǎn)能將快速擴(kuò)展至200萬(wàn)噸/年以上，屆時(shí)將可能出現(xiàn)供應(yīng)過(guò)剩的局面。

我國(guó)在2006～2007年掀起了環(huán)氧氯丙烷建設(shè)熱潮。2007年，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)廠家由2005年的4家增長(zhǎng)到10余家，新增產(chǎn)能約為38.3萬(wàn)噸/年。其中，有32.3萬(wàn)噸/年的新增產(chǎn)能采用丙烯高溫氯化法，有6萬(wàn)噸/年裝置采用甘油氯代法。2007年，國(guó)內(nèi)產(chǎn)能增加到49.7萬(wàn)噸/年，產(chǎn)量約為28萬(wàn)噸左右，同比2006年的10.21萬(wàn)噸增長(zhǎng)了146%。

由于下游市場(chǎng)需求強(qiáng)勁，加上2005～2006年國(guó)內(nèi)供應(yīng)緊張，產(chǎn)品利潤(rùn)空間較大，目前國(guó)內(nèi)仍有多套環(huán)氧氯丙烷裝置正在建設(shè)或計(jì)劃建設(shè)。隨著全球生物柴油產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，國(guó)外主要環(huán)氧氯丙烷生產(chǎn)商紛紛建設(shè)或計(jì)劃建設(shè)甘油氯代法生產(chǎn)線，而且多選擇在市場(chǎng)需求量大的亞洲地區(qū)。假如國(guó)內(nèi)的這些計(jì)劃建設(shè)項(xiàng)目部分順利建成投產(chǎn)，到2010年我國(guó)環(huán)氧氯丙烷的生產(chǎn)能力將達(dá)到65萬(wàn)～75萬(wàn)噸/年。

2、市場(chǎng)需求狀況

國(guó)內(nèi)環(huán)氧氯丙烷主要用于環(huán)氧樹脂生產(chǎn)，約占總消費(fèi)量的90%左右，其次是合成甘油占4%左右，氯醇橡膠占2%，其他領(lǐng)域占4%左右。由于國(guó)內(nèi)環(huán)氧氯丙烷市場(chǎng)消費(fèi)領(lǐng)域單一，下游環(huán)氧樹脂需求的迅速增長(zhǎng)便成為推動(dòng)環(huán)氧氯丙烷發(fā)展的主要?jiǎng)恿?。?guó)內(nèi)2005年環(huán)氧氯丙烷表觀消費(fèi)量為19萬(wàn)噸，自給率為47.2%；2007年表觀消費(fèi)量約33萬(wàn)噸左右，自給率約為83%。消費(fèi)量和自給率都呈現(xiàn)快速增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)。

目前，國(guó)內(nèi)環(huán)氧樹脂的需求仍保持較快的增長(zhǎng)。盡管近年來(lái)國(guó)內(nèi)產(chǎn)能迅猛增長(zhǎng)但仍無(wú)法滿足需求，每年需要進(jìn)口大量環(huán)氧樹脂滿足國(guó)內(nèi)市場(chǎng)需求。2005～2007年，國(guó)內(nèi)環(huán)氧樹脂的凈進(jìn)口量分別為18.2萬(wàn)噸、18.2萬(wàn)噸、17.5萬(wàn)噸。從國(guó)內(nèi)環(huán)氧樹脂市場(chǎng)的缺口數(shù)據(jù)來(lái)看，未來(lái)國(guó)內(nèi)環(huán)氧氯丙烷的市場(chǎng)需求仍將保持較高速度增長(zhǎng)。預(yù)計(jì)到2010年，國(guó)內(nèi)環(huán)氧氯丙烷的市場(chǎng)需求量將達(dá)到66萬(wàn)噸左右。屆時(shí)，國(guó)內(nèi)產(chǎn)能將達(dá)到65萬(wàn)～75萬(wàn)噸/年，基本上能夠自給，將不再需要進(jìn)口產(chǎn)品來(lái)滿足國(guó)內(nèi)市場(chǎng)需求。

1、嬰兒奶粉

1）市場(chǎng)現(xiàn)狀

近年來(lái)，伴隨著我國(guó)乳品行業(yè)和嬰幼兒食品行業(yè)的快速發(fā)展，我國(guó)嬰幼兒配方奶粉市場(chǎng)發(fā)展迅速。2006年，我國(guó)嬰幼兒奶粉市場(chǎng)持續(xù)“走高”。我國(guó)高端嬰幼兒奶粉市場(chǎng)銷量保持兩位數(shù)的增長(zhǎng)速度，有望取代日本，成為僅次于美國(guó)的全球嬰幼兒奶粉第二市場(chǎng),中國(guó)是全球嬰幼兒配方奶粉發(fā)展?jié)摿ψ畲蟮氖袌?chǎng)。2004年中國(guó)嬰幼兒奶粉市場(chǎng)容量為70億元，2006年約110億元，每年復(fù)合增長(zhǎng)率在30％左右，高端嬰兒奶粉市場(chǎng)約為50億元。

2007年、2008年是中國(guó)的生育高峰，北京和上海預(yù)計(jì)有10萬(wàn)以上的新生兒，全國(guó)城市0—3歲嬰幼兒數(shù)量約1090萬(wàn)。這樣一個(gè)龐大的用戶群對(duì)國(guó)際奶粉巨頭無(wú)疑是一個(gè)誘惑。隨著液態(tài)奶競(jìng)爭(zhēng)的激烈和利潤(rùn)的下降，奶粉就成為各乳業(yè)巨頭關(guān)注的焦點(diǎn)。從成本上看，高中檔產(chǎn)品成本差異不大，但利潤(rùn)相差將近一倍多，高檔利潤(rùn)在20%以上，中檔只有10%左右，個(gè)別品牌之間的差異甚至更大。

長(zhǎng)期以來(lái)，80%左右的高端奶粉市場(chǎng)都掌握在雅培、雀巢、惠氏、多美滋等洋品牌手中。2004年后，三鹿、伊利、雅士利、圣元、完達(dá)山等國(guó)產(chǎn)奶粉品牌開始向中高端市場(chǎng)發(fā)力。2006年底，國(guó)內(nèi)奶業(yè)巨頭蒙牛也與國(guó)際乳業(yè)巨頭丹麥阿拉·福茲公司聯(lián)手斥資5.4億元，主攻嬰兒奶粉的高檔配方奶粉，其第一款高端嬰幼兒配方奶粉已經(jīng)上市。

2007年我國(guó)嬰幼兒奶粉市場(chǎng)品牌占有率情況

 

目前的嬰兒奶粉市場(chǎng)并不成熟，今后國(guó)際品牌嬰兒奶粉會(huì)繼續(xù)進(jìn)入中國(guó)，勢(shì)必會(huì)給其他老牌的歐美企業(yè)帶來(lái)很大的沖擊。洋奶粉的核心競(jìng)爭(zhēng)力在于品牌和服務(wù)，正是良好的品牌形象和細(xì)致的服務(wù)支撐了其高價(jià)格、高利潤(rùn)，而得到市場(chǎng)認(rèn)可的國(guó)產(chǎn)奶粉和洋奶粉在價(jià)格上的差距已經(jīng)不是很明顯，但高價(jià)格將勢(shì)必超過(guò)部分消費(fèi)者的心理限價(jià)，很容易造成價(jià)格崩盤。一旦價(jià)格崩盤，市場(chǎng)上出現(xiàn)的收拾殘局者將成為最大贏家，就如同蒙牛和伊利收拾液態(tài)奶的殘局一樣。

2）發(fā)展前景

目前我國(guó)乳品企業(yè)共有1500家左右，嬰幼兒奶粉在企業(yè)生產(chǎn)的奶粉總量中，占到了三分之一以上，但在目前的嬰幼兒奶粉中，高檔奶粉的比例遠(yuǎn)不到三分之一，因此其市場(chǎng)空間還非常廣闊。

由于中國(guó)的計(jì)劃生育政策，我國(guó)城市家庭處于4～6個(gè)成年人撫養(yǎng)一個(gè)寶寶的階段。不要讓自己的孩子輸在起跑線上！成為父母一個(gè)堅(jiān)定的信念。引起他們，特別是中高收入的家庭，在選擇嬰幼兒配方奶時(shí)，奶粉的營(yíng)養(yǎng)成分已經(jīng)凌駕于價(jià)格之上。因此，嬰幼兒配方奶粉高端市場(chǎng)有極大的發(fā)展?jié)摿Α?/div>

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